Cellules stromales du tissu adipeux en ingénierie tissulaire des parodontites : développement de modèles d'étude ex vivo innovants dédiés au suivi des interactions cellulaires

Broca, Clothilde (2022) Cellules stromales du tissu adipeux en ingénierie tissulaire des parodontites : développement de modèles d'étude ex vivo innovants dédiés au suivi des interactions cellulaires. Thèse d'exercice en Thèses > Dentaire, Université Toulouse III - Paul Sabatier.

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Résumé en français

Les parodontites sont des maladies inflammatoires chroniques des tissus de soutien des dents dont les traitements actuels demeurent limités. L'ingénierie tissulaire combinant des cellules stromales mésenchymateuses du tissu adipeux (ASC) à un hydrogel de lysat plaquettaire (hLP) constitue une stratégie prometteuse dans le cadre de la régénération parodontale. Cependant, il existe à ce jour peu d'informations sur les interactions entre les ASC greffées et les MSC gingivales (MSC-G) endogènes à l'origine de ce processus. Ainsi, l'objectif de notre projet est de mettre au point des modèles pertinents afin d'étudier, par des approches de microscopie 3D, la contribution des ASC transplantées au processus de régénération parodontale, et notamment leurs interactions cellulaires avec les MSC-G endogènes dans le cadre de l'ingénierie tissulaire des parodontites. Ce travail a permis la synthèse et la valorisation des données générées par l'équipe. A ce titre, des traceurs fluorescents efficaces ont été identifiés pour le suivi de co-cultures d'ASC et de MSC-G humaines. Deux modèles d'étude ex vivo ont été développés grâce à un hLP d'ASC marquées, soit intégrant un sphéroïde de MSC-G ou de leurs progéniteurs, soit placé entre un explant de gencive humaine et une tranche de dentine, en vue de leur exploration en 3D par microscopie à feuille de lumière. La sonde sélectionnée en 2D, ciblant un organite des ASC, ne rend pas compte de leur étalement dans l'hLP entre gencive et dentine au cours du temps. Concernant le premier modèle, un protocole alternatif devra être testé pour parvenir à une constitution convenable de sphéroïdes issus de fraction stromale vasculaire (SVF) parodontale, avant d'étudier leur interaction avec des ASC dans un hLP. Ces modèles s'avèrent prometteurs mais nécessitent des mises au point supplémentaires, notamment afin de pallier les contraintes liées à la préparation des échantillons pour l'imagerie. Ces derniers permettront ainsi de décrypter les mécanismes biologiques impliqués dans la reprogrammation homéostatique, immunitaire et stromale du parodonte, afin de définir les bases pour une translation en clinique vétérinaire et humaine sécurisée et rationnelle.

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