Développement de modèles organotypiques d'ichtyose par invalidation du gène PNPLA1 dans des kératinocytes immortalisés N/TERT-2G

Bernard, Pauline (2022) Développement de modèles organotypiques d'ichtyose par invalidation du gène PNPLA1 dans des kératinocytes immortalisés N/TERT-2G. Thèse d'exercice en Thèses > Médecine spécialisée, Université Toulouse III - Paul Sabatier.

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Résumé en français

Les ichtyoses congénitales sont des maladies monogéniques rares caractérisées par une altération de la barrière épidermique. La moitié des gènes en cause sont impliqués dans le métabolisme des ?-o-acylcéramides épidermiques (CerEOS). Parmi eux, le gène PNPLA1 (Patatin-like phospholipase domain containing-1) code pour une transacylase responsable de la dernière étape de synthèse des CerEOS. Les épidermes humains reconstruits (RHEs) sont un modèle bien défini pour l'étude de la physiopathologie et des traitements en dermatologie mais peu de modèles organotypique d'ichtyose sont disponibles à ce jour. Nous avons d'abord comparé la capacité de la lignée kératinocytaire immortalisée N/TERT-2G à reproduire les caractéristiques de RHE obtenus à partir de kératinocytes humains normaux. Ensuite, PNPLA1 a été inactivé dans les N/TERT-2G par le système CRISPR-Cas9 et les modèles organotypiques dérivés de ces clones PNPLA1KO ont ensuite été caractérisés et comparés aux N/TERT-2G " sauvages ". Le modèle d'épiderme reconstruit PNPLA1 KO sera utilisé dans un projet de recherche préclinique de thérapie des ichtyoses par substitution lipidique. Ce travail ouvre également la voie à la production de nouveaux modèles, ciblant d'autres gènes, qui seront avantageux pour mener de futures recherches fondamentales et biocliniques.

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